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当料温降至40°C时,移入接种袋或接种箱中,然后放入酒精、棉塞、包扎带、气雾消毒盒、火机、接种钩、菌种,菌种好用百菌清或5%水浸洗,同时有红、绿、黄等色杂菌的菌种,每四筒料放一包菌种。一切就绪后封闭接种箱,点燃消毒盒20分钟后可实现接种,接种时操作人员预先用75%酒精消毒双手,然后小心伸入接种箱中,从尾部撕开种袋接种,种头接近棉塞处的表皮种 弃之不用。地养室培养,此时培养室温度保持24~30°C,12小时后种子开始萌发吃料,20天后当菌丝长至筒料一半时,把接种端袋口稍稍打开通气培养,菌丝长满后,零星出现原基时,进入菌棚排场管理。
我国是世界上三大锻木(原木)灵芝产区之一(另有韩国、日本),产量占世界总产量的50%以上。浙江从1989年开始灵芝人工栽培试验并取得成功,1992年农民利用纯锻木仿生法大规模栽培灵芝,产业化经营至2007年,平均每年锻木投放量3000立方米(高时达7000立方米),年产干灵芝150吨,占全国总量的四分之一。2008年以来浙江省中药产业协会将灵芝重点扶持产业,市场上灵芝产品越来越多,包括灵芝子实体、抱子粉、菌丝体为主要成分的和药品,广泛应用于肿瘤、冠心病、心绞痛、高脂血症、高血压病、、慢性支气管炎和哮喘、神经衰弱、肝炎等。但国内外灵芝药材及其产品均无系统的质量控制体系,对灵芝及其产品质量的控制大多都停留在主要活性成分定性评价的水平上,灵芝品种使用也是几十年一成不变,单一品种的重复使用,菌种种性退化明显,与“、有效、稳定、可控叩勺中药现代化、国际化要求存在相当差距,建立灵芝功效成分定性与定量结合的评价方法,控制灵芝及其产品质量,对灵芝产业可持续发展具有重要意义。
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碾压、挤压法.在低温等条件下,利用罐体和球磨等的迅速摆动、碾磨、挤压将灵芝抱子破壁.利用高能纳米冲击磨对灵芝抱子进行破壁处理,灵芝抱子的破壁率在80%以上,且能有效解决黏球、黏壁现象.高压气爆法.高压气爆法通过在某一时间内将未破壁的灵芝抱子维持在高压力的状态中,然后在另一时间内泄压至较低压力,使灵芝抱子细胞壁上的孔穴增大和增多.例如,刘东波等运用高压气爆法处理灵芝抱子样品后,灵芝多糖和三萜提取率有较大提高. 气流粉碎法.气流粉碎法使压缩空气通过特定角度的研磨嘴进入研磨腔,产生高速的螺旋状气流,物料在螺旋气流的带动下在研磨腔内高速旋转,颗粒间由于不同速度而产生碰撞,从而达到粉碎的效果.例如,肖鑫等利用高压气流粉碎法处理灵芝抱子,破壁率达99%以上.
四、混合料的加入与比例混合料是填充袋内段木与段木之间的主要物质,它是灵芝菌丝体初的营养源。其配方为:阔叶木屑75%、细米糠或麦麸21%、白糖或红糖1%、石膏1%、硫酸镁0.1%、合成色素0.3%、合成蛋白胨0.54%、灵芝生物素0.06%、腐质土1%,料水比为5:5。将硫酸镁、生物素、色素、合成蛋白胨、白糖溶入水中,与上述原料拌匀,填入已装好段木的栽培袋中,注意段木与段木之间的空隙一定要填实,料面超出段木面2厘米即可封袋,并立即进入灭菌程序。五、灭菌灭菌可采用高压或常温蒸笼,无论采用哪一种灭菌,都要考虑料之间的水蒸气流通,以收到充分灭菌的效果,采用高压灭菌的,升火前应打开放气阀门,当水蒸气大量喷发时,关闭放气阀,加大火力,当压力表盘为0.15帕次放气时开始计时,在此气压下持续4个小时即可停火。当压力表降至0帕时,打开放气阀排气,把压力锅门打开自然降温。采用常用灭菌的,在蒸笼底部一角放一支温度计,升火后温度至100°C时开始计时,维持12个小时后停火,闷上一夜,然后打开蒸。
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